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ARTICLES微衛(wèi)星分析服務 短串聯(lián)重復(Short tandem repeats, STR),又稱微衛(wèi)星DNA(Microsatellite DNA)或簡單重復列. (Simple repeat sequence, SRS或SSR),是廣泛存在于原核生物和真核生物基因組中的核苷酸重復序列。 由于微衛(wèi)星等位基因具有突變速率快、多態(tài)性高等特性,因此在生物遺傳作圖、群體遺傳研究、個體間親緣 關系鑒定等方面已得到廣泛
SNP/CNVIAFLP基因分型服務 基因分型(Genotyping) 是利用生物學檢測方法測定個體基因型(Genotype) 的技術。又稱為基因型 分析(Genotypic assay)。
慢病毒構建并包裝后,以進行貼壁細胞或懸浮細胞的轉染。具體流程如下: 1. 對慢病毒基因進行改造,即敲除U3端的400bp的特定基因,使其逆轉錄和整合的能力,但保留產生病毒顆粒必須的蛋白的能力。 2. 向上述基因中插入目的基因。與具有包裝功能的質粒同時進行對包裝細胞的轉染。在細胞上清中獲得攜帶目的基因的復制缺陷型慢病毒載體顆粒。
三種擴大貼壁細胞培養(yǎng)的方法:維持其在培養(yǎng)皿表面(2D)的生長狀態(tài),進行傳代培養(yǎng)放大;進行貼壁細胞分離,隨后在發(fā)酵罐的3D培養(yǎng)中進行小試到大規(guī)模的逐級放大;采用含有微載體的攪拌發(fā)酵罐進行培養(yǎng)。2D培養(yǎng)即采用多培養(yǎng)皿或多層搖瓶進行培養(yǎng)放大。
傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內,再進行培養(yǎng)的過程。$n$n原理:細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續(xù)生長,同時也將細胞數量擴大,須進行傳代再培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。
細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系獲得的具有特殊性質的細胞。因此,欲構建細胞株,首先需獲得穩(wěn)定的細胞系。構建流程如下: 1. 細胞培養(yǎng)(原核:大腸桿菌,真核:CHO細胞) 2. 質粒的瞬時轉染。 3. 向轉染后的細胞培養(yǎng)基中加入抗生素規(guī)定濃度的抗生素進行穩(wěn)定細胞株篩選。 4. Western blot或ELISA檢測蛋白的表達情況,篩選比較高克隆進行傳代并保存
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