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抗體穩(wěn)定性改進
抗體在分子生物學實驗中的應用,隨著分子生物學發(fā)展的進步而越來越成熟,而抗體的穩(wěn)定性是自然界長期進化的結果,在眾多物種中,抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結構,分子中70% 氨基酸殘基(免疫球蛋白結構域)以beta的片層(beta-sheet)形式堆疊,形成緊密并能耐受蛋白酶作用的“三明治"結構,輕鏈和重鏈通過保守的二硫鍵形成具有三個結構域的免疫球蛋白,大大提高了分子本身的穩(wěn)定性。
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ARTICLES技術簡介:
抗體在分子生物學實驗中的應用,隨著分子生物學發(fā)展的進步而越來越成熟,而抗體的穩(wěn)定性是自然界長期進化的結果,在眾多物種中,抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結構,分子中70% 氨基酸殘基(免疫球蛋白結構域)以beta的片層(beta-sheet)形式堆疊,形成緊密并能耐受蛋白酶作用的“三明治”結構,輕鏈和重鏈通過保守的二硫鍵形成具有三個結構域的免疫球蛋白,大大提高了分子本身的穩(wěn)定性。
抗體的穩(wěn)定性主要包括如下幾個方面:
抗體分子的高Tm值
有數(shù)據(jù)表明,在70℃時抗體分子才開始明顯地去折疊(unfold),而這一過程之前的變化也具有相當?shù)目赡嫘浴R簿褪钦f,在室溫下,甚至短時間溫度達到50-60度,抗體分子都能維持正確折疊,保持應有的活性。
抗體純度
高純度的抗體產(chǎn)品,去除了包括各種蛋白酶在內(nèi)的雜質,保證了抗體的穩(wěn)定性。
抗體濃度
高濃度的抗體產(chǎn)品可減少容器表面吸附造成的物質損失。
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